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Service de trangénèse

Description et activités

Le service de transgenèse ciblée-cellules ES murines du réseau des animaleries montpelliérain (RAM), propose aux scientifiques de prendre en charge la création de modèles murins.
Le service a comme mission principale : (i) la prise en charge des différentes étapes qui conduisent à développer de nouveaux modèles par la recombinaison homologue, (ii) la création de modèles utilisant les technologies récentes (Zinc-Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucléases (TALENs)) et (iii) la dérivation des cellules ES à partir du stade blastocyste de modèles établis. Par ailleurs, le service exerce une activité de conseil scientifique par le biais d’une veille bibliographique, par son étroite collaboration avec l’ensemble des experts des centres de transgenèse ainsi que par ses liens avec les consortii internationaux. Ainsi, il assure un soutien scientifique sur les possibilités et les limites des techniques. Enfin, le service propose une diffusion des nombreuses approches possibles pour créer des modèles murins (KO, KI) en utilisant les cellules ES, y compris les récentes avancées de la transgenèse ciblée directement dans les zygotes.

• Equipements/personnels

Laboratoire de Transgenèse ciblée-Cellules ES :
1 personne responsable du service + 1 vacataire pour le week-end
1 poste de micro-injection motorisée Leïca, 2 hottes PSM, 2 incubateurs, 1 réfrigérateur, 2 congélateurs, 1 centrifugeuse, 1 bain-marie

Laboratoire de réimplantation :
1 stéréomicroscope
1 plaque chauffante pour petit animal (chambre de réveil)


• Expertise – Prestations (Nature et description)

*Transgenèse ciblée :
- KO conditionnel (Cre/Lox) - KO Inductible
- KO par recombinaison homologue
- KI par RMCE
- KO et KI par les nucléases (TALEN, ZFN)
 Le service propose (i) l’electroporation des vecteurs de recombinaison homologues dans les cellules ES. Et assure par conséquent la culture de ces cellules, la sélection des recombinants, leur repiquage individuel, leur amplification pour l’extraction de l’ADN en vue de son analyse, leur conservation par congélation ainsi que le caryotypage des clones ES recombinants (ii) la microinjection d’au moins 2 clones recombinants dans les blastocystes en vu de produire au moins 3 chimères (iii) la microinjection intracytoplasmique de nucléases dans les zygotes

*Culture des cellules ES :
- Dérivation des cellules ES à partir de blastocystes


• Spécificités, originalité

Transgenèse ciblée par les nucléases et par recombinaison homologue, dérivation des cellules ES à partir du stade blastocyste

• Contact

Christina BEGON-PESCIA _ christina.pescia@igmm.cnrs.fr _ Phone : 04 34 35 97 14


 
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